白色念珠菌檢測方法

一、菌株培養(yǎng)

1、增菌培養(yǎng)   
        取供試液10ml（相當(dāng)于供試品1g、ml、10cm2）直接或處理后接種至適量（不少于100ml）的沙氏葡萄糖肉湯培養(yǎng)基中，培養(yǎng)48～72小時(shí)。

2、分離培養(yǎng)    
        取上述培養(yǎng)物劃線接種于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)24～48小時(shí)（必要時(shí)延長至72小時(shí)）。

二、結(jié)果判斷

        1、白色念珠菌在沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長的菌落呈乳白色偶見淡黃色，表面光滑有濃酵母氣味，培養(yǎng)時(shí)間稍久則菌落增大，顏色變深、質(zhì)地變硬或有皺摺。若平板上無菌落生長或生長的菌落與上述菌落形態(tài)特征不符，判供試品未檢出白色念珠菌。 

        2、如平板上生長的菌落與上述菌落形態(tài)特征相符或疑似，應(yīng)挑選2～3個(gè)菌落分別接種至念珠菌顯色培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)24～48小時(shí)（必要時(shí)延長至72小時(shí)）。若平板上無綠色或翠綠色的菌落生長，判供試品未檢出白色念珠菌。

        3、若平板上生長的菌落為綠色或翠綠色，挑取相符或疑似的菌落接種于1%吐溫80玉米瓊脂培養(yǎng)基上，培養(yǎng)24～48小時(shí)。取培養(yǎng)物進(jìn)行染色，鏡檢及芽管試驗(yàn)。

        4、芽管試驗(yàn)　挑取1%吐溫80玉米瓊脂培養(yǎng)基上的培養(yǎng)物，接種于加有一滴血清的載玻片上，蓋上蓋玻片，置濕潤的平皿內(nèi)，置電熱恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)35～37℃、1～3h，置顯微鏡下觀察，可見到由孢子長出短小芽管。