純牛奶菌落總數(shù)的測定方法

優(yōu)質(zhì)生鮮奶的分為特優(yōu)級(jí)、優(yōu)級(jí)、良級(jí)和合格級(jí)四個(gè)等級(jí)，而分級(jí)的依據(jù)主要是檢測判斷鮮奶是否品質(zhì)高的4個(gè)核心指標(biāo)數(shù)值，即乳脂率、乳蛋白率、菌落總數(shù)和體細(xì)胞數(shù)。在奶業(yè)發(fā)達(dá)國家的標(biāo)準(zhǔn)里，上述四個(gè)核心指標(biāo)的數(shù)值基本要達(dá)到牛奶中的乳脂肪含量不低于3.3%，乳蛋白含量不低于3.0%，體細(xì)胞數(shù)不超過75萬個(gè)/ML，菌落總數(shù)不超過10萬CFU/ML。以下是使用恒溫恒濕培養(yǎng)箱測定純牛奶菌落總數(shù)的一般步驟：

       1. 取樣：取10ml純牛奶置盛有90ml磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1-2分鐘，制成1:10的樣品勻液。

       2. 配制濃度梯度：用1ml無菌吸管或移液槍吸取1:10樣品勻液1ml，沿管壁緩慢注于盛有9ml稀釋液的無菌試管中（注意吸管或吸頭不要觸及稀釋液面），用漩渦震蕩器混合均勻，制成10-2的樣品勻液。按上述操作程序，制備10-3、10-4系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用1次1ml無菌吸管或吸頭。

       3. 接種：取一定量的稀釋液，使用無菌技術(shù)將其接種到適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上。常見的培養(yǎng)基包括營養(yǎng)瓊脂或平板計(jì)數(shù)瓊脂。

       4. 培養(yǎng)：將接種后的培養(yǎng)基放入恒溫恒濕培養(yǎng)箱中，設(shè)置適宜的溫度和濕度條件。一般培養(yǎng)溫度為 37°C，培養(yǎng)時(shí)間根據(jù)培養(yǎng)基和檢測要求而定，通常為 24-48 小時(shí)。

       5. 計(jì)數(shù)：培養(yǎng)結(jié)束后，觀察培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)量?？梢允褂糜?jì)數(shù)器或手動(dòng)計(jì)數(shù)方法，記錄每個(gè)稀釋度的菌落數(shù)。

       6. 計(jì)算：根據(jù)記錄的菌落數(shù)，計(jì)算出原始樣品中的菌落總數(shù)。通常使用菌落計(jì)數(shù)公式進(jìn)行計(jì)算，如平板計(jì)數(shù)法或稀釋倍數(shù)法。

       7. 結(jié)果報(bào)告：將計(jì)算得到的菌落總數(shù)報(bào)告為每毫升或每克樣品中的菌落數(shù)量。

      需要注意的是，在進(jìn)行菌落總數(shù)測定時(shí)，要嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程，以避免外部污染對(duì)結(jié)果的影響。此外，恒溫恒濕培養(yǎng)箱的條件應(yīng)根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行設(shè)置和控制，以確保培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。