生化培養(yǎng)箱測定肉制品菌群的實驗步驟

實驗準(zhǔn)備

      培養(yǎng)基配制：

      準(zhǔn)備不同類型的培養(yǎng)基，如伊紅美蘭瓊脂培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、乳糖膽鹽液體培養(yǎng)基等。

      按照配方準(zhǔn)確稱量培養(yǎng)基成分，溶解于蒸餾水中。

      將配制好的培養(yǎng)基分裝到適當(dāng)?shù)娜萜髦?，如試管、培養(yǎng)皿等。

      滅菌：

      使用高壓蒸汽滅菌器對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌，通常在121°C、15 psi（約1.05 kg/cm²）的條件下滅菌15至20分鐘。

      對實驗器材，如培養(yǎng)皿、移液管、試管等，進行干熱滅菌，通常在160°C至180°C的條件下滅菌2小時。

      采樣與培養(yǎng)

      采樣：

      從肉制品中取適量樣本，通常為25克。

      將樣本加入到含有225毫升已滅菌的乳糖膽鹽液體培養(yǎng)基的試管中。

      培養(yǎng)：

      將接種后的試管放入生化培養(yǎng)箱中，設(shè)置適當(dāng)?shù)臏囟龋ㄍǔ?6°C±1°C）。

      培養(yǎng)時間通常為18至24小時。

      觀察產(chǎn)氣情況與稀釋

      觀察產(chǎn)氣：

      培養(yǎng)結(jié)束后，觀察試管中的產(chǎn)氣情況，記錄陽性管數(shù)。

      系列稀釋：

      對樣本進行系列稀釋，以便于后續(xù)的微生物分離。常用的稀釋液包括生理鹽水、磷酸鹽緩沖液等。

      劃線與涂布

      平板劃線法：

      使用無菌接種環(huán)，在已滅菌的瓊脂培養(yǎng)基表面劃線，通過劃線來稀釋和分離微生物。

      涂布平板法：

      將系列稀釋后的樣本涂布在瓊脂培養(yǎng)基表面，使用無菌涂布器均勻涂布。

      鑒定

      菌落觀察：

      觀察培養(yǎng)基上的菌落特征，如大小、形狀、顏色、光澤等。

      革蘭氏染色與鏡檢：

      對疑似菌落進行革蘭氏染色，并在顯微鏡下觀察其形態(tài)和染色特性，以鑒定是否為特定菌種（如大腸菌群）。

      菌種保藏

      將分離純化后的菌種轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)谋２亟橘|(zhì)中，如瓊脂斜面、甘油管等，并存放在低溫（如-80°C）冰箱中，以備后續(xù)使用。

      這些步驟為一般的肉制品菌群測定流程，具體操作時可能需要根據(jù)實驗?zāi)康?、所使用的培養(yǎng)基和儀器設(shè)備等因素進行調(diào)整