細(xì)胞培養(yǎng)箱的清潔和消毒

1.   培養(yǎng)箱消毒：先用純水擦洗，再用95的酒精擦洗，再照紫外就可以拉！注意周圍環(huán)境的清潔就不會(huì)那么容易污染的拉！

2.   我的經(jīng)驗(yàn)是在補(bǔ)充水時(shí)把水加熱一下，達(dá)到培養(yǎng)箱的溫度。

3.   這么早就養(yǎng)細(xì)胞了，我們這里一般是用70％的乙醇擦洗，然后再用0.1％的新潔爾滅擦洗，不放心的話再用高錳酸鉀加甲醛1：1比例熏一遍。注意要是熏的話千萬注意混合之后馬上離開，然后密閉細(xì)胞培養(yǎng)室，味道很刺激的。在養(yǎng)細(xì)胞前消毒，否則，確實(shí)沒地方放細(xì)胞。

4.   我們的方法比較簡(jiǎn)單，先用75%酒精擦拭內(nèi)壁，通風(fēng)10分鐘，紫外線照射30分鐘即可。

5.   我們的通常處理是先用75%的酒精擦拭內(nèi)壁，然后用甲醛+高錳酸鉀熏蒸一個(gè)晚上，然后通風(fēng)一整天（同時(shí)打開紫外線照射）。

6.   我們是把培養(yǎng)箱里的板層拿出來高壓一下，箱壁用75％酒精擦一遍，換用詩(shī)樂氏擦一遍，再紫外照一夜，效果很好，其他的請(qǐng)高手指教。

7.   熏蒸后吹一天是不夠的，zui起碼要一個(gè)星期才可以讓甲醛散盡，要不細(xì)胞長(zhǎng)不好的

8.   有的培養(yǎng)箱能加熱內(nèi)壁到90度，也有的帶有紫外線功能。常規(guī)應(yīng)該每周用酒精擦洗內(nèi)部一次。具體的操作請(qǐng)參考培養(yǎng)箱的手冊(cè)，或著咨詢培養(yǎng)箱。使用消毒劑應(yīng)小心，培養(yǎng)箱內(nèi)有檢測(cè)溫度、濕度和二氧化碳濃度的傳感器，腐蝕性消毒劑或有機(jī)溶劑有可能損壞某些器件，請(qǐng)慎用。另外，揮發(fā)性的甲醛有毒，易燃、易爆。如果在培養(yǎng)箱內(nèi)殘留甲醛的話，細(xì)胞會(huì)死光光哦（我實(shí)驗(yàn)室的真實(shí)故事）?？傊?，先看培養(yǎng)箱手冊(cè)，再，方可*啊。

9.   常規(guī)什么也不放！硫酸銅的作用是抑制細(xì)菌生長(zhǎng)（但多數(shù)用在處理污染的孔板）。因?yàn)楝F(xiàn)在的孵箱都有抑菌功能。

10.   我們實(shí)驗(yàn)室的做法:把平皿高壓滅菌后,在無菌操作臺(tái)內(nèi)加入適量的滅菌雙蒸水或者生理鹽水.再加少量新潔爾滅,濃度沒關(guān)系.細(xì)胞養(yǎng)的都可以.

11.   我建議

1 先把培養(yǎng)箱*消毒.具體方法也是用75%的酒精好好清洗培養(yǎng)箱.

2,操作時(shí)嚴(yán)格按照無菌操作的原則

3 我認(rèn)為雙抗的更換問題倒是不大,除非你正在使用的是污染的抗生素.

4 盡量減少觀看細(xì)胞的次數(shù)及時(shí)間.

12.   我們實(shí)驗(yàn)室清潔培養(yǎng)箱的方法：用洗衣粉或洗潔精洗一遍——清水沖凈——84消毒液洗——清水沖凈——75％酒精擦洗一遍

13.   這是我們實(shí)驗(yàn)室常規(guī)的培養(yǎng)箱消毒方法（一般一個(gè)月一次），希望對(duì)你會(huì)有用

14.   首先把培養(yǎng)箱里的東西全部取出，放盡培養(yǎng)箱里的三蒸水；反復(fù)用三蒸水沖洗培養(yǎng)箱，然后用75%酒精擦3遍，之后再用三蒸水擦3遍；培養(yǎng)箱里的架子先用自來水反復(fù)沖洗，然后用蒸餾水、三蒸水、75%酒精各擦3次，于紫外下照射消毒1 h左右；zui后將三蒸水（里面應(yīng)加少許染料）加入培養(yǎng)箱，將消毒好的架子放入即

15.   培養(yǎng)箱應(yīng)放置無菌室,水中應(yīng)加適量的疊氮鈉(防腐)或者硫酸銅,注意空氣消毒.

16.   消毒培養(yǎng)箱的常用方法有兩種：

把細(xì)胞移出，記住擰緊瓶蓋，通常放在超凈臺(tái)內(nèi)，室溫一兩個(gè)小時(shí)，問題不大。如培養(yǎng)室有空調(diào)，也可將空調(diào)打開。然后先用75%酒精棉球擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁，注意不要漏掉任何一個(gè)角落。擦拭兩遍后用一蒸水或二蒸水清洗內(nèi)壁，可多清洗幾遍。zui后用消過毒的棉球或75%酒精棉球把內(nèi)壁再擦拭一遍即可。整個(gè)操作沒有必要在無菌條件下。zui后可在培養(yǎng)箱的水里加上亞甲基藍(lán)，混勻即可。亞甲基藍(lán)溶液可起到一定的抑菌殺菌作用。待培養(yǎng)箱內(nèi)酒精幾乎揮發(fā)完時(shí)，將細(xì)胞放入培養(yǎng)箱中。

還有一種辦法就是直接用蒸餾水清洗完，然后再用紫外燈照(是那種培養(yǎng)箱里就帶有紫外燈的，就方便多了。)

通常培養(yǎng)箱是需要定期清洗的，我們室是1-2月清洗一次，當(dāng)然這要根據(jù)細(xì)胞養(yǎng)的多少和培養(yǎng)箱使用的頻繁程度來決定的。

17.   我們實(shí)驗(yàn)室液發(fā)生過類似事件，我把我們處理過程告訴你，希望對(duì)你有幫助：

首先消毒培養(yǎng)箱，如果你們有兩個(gè)或以上培養(yǎng)箱就好辦了，如果只有一個(gè)且還有很多其他細(xì)胞就麻煩點(diǎn)。只能暫時(shí)的放在超凈臺(tái)上。具體如下，中午將空調(diào)溫度打到zui高（也只有31度），超凈臺(tái)開紫外。下午早點(diǎn)來關(guān)紫外，將細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋蓋緊，轉(zhuǎn)到超凈臺(tái)內(nèi)，用75％酒精擦洗培養(yǎng)箱，再用無臭氧型可移動(dòng)的紫外等照射半小時(shí)，然后將細(xì)胞放回，松開蓋口即可（切記CO2瓶子閥門要關(guān)緊啊，不然氣全跑光了）。

一般實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)了霉菌的話，肯定要全部消毒。

再消毒實(shí)驗(yàn)室，先把室內(nèi)空調(diào)和消毒柜過濾網(wǎng)都拆下清洗，在錐形瓶?jī)?nèi)加點(diǎn)高錳酸鉀，放在實(shí)驗(yàn)室地上，然后倒入甲醛，立馬關(guān)門走人就可以了。

2天后再開門裝好東西，和往常一樣開始工作了。由于2天不能做事，個(gè)人細(xì)胞要先計(jì)劃好，大家都可以休息兩天。

18.   我們實(shí)驗(yàn)室是將細(xì)胞全部取出，酒精擦洗培養(yǎng)相，然后用紫外線照射4小時(shí)以上，污染細(xì)胞全部丟掉。還有就是培養(yǎng)室也采用紫外線消毒

19.   我也碰過這個(gè)情況，是自己的基礎(chǔ)培養(yǎng)基污染了，光鏡下面可以看見瓶底有細(xì)細(xì)的黑色小顆粒，但具體原因不詳。處理方法：

1、被污染的細(xì)胞全部照過紫外線2小時(shí)以上后扔掉；

2、同一批的培養(yǎng)基、使用的細(xì)胞清洗液等等全部重新濾過消毒（有點(diǎn)舍不得全部扔掉，就嘗試了一下，結(jié)果證明是可以的）；

3、打開培養(yǎng)箱，用75%酒精擦洗，然后用新潔爾滅擦洗（此步驟我們重復(fù)了2次，隔天），用紫外照射4小時(shí)以上；

4、清掃培養(yǎng)室，紫外照4小時(shí)以上，重復(fù)一次；

后來就沒有啦。：）如果污染嚴(yán)重的話，那就要重復(fù)重復(fù)再重復(fù)了。

20.   偶也在年前遇到兩次大爆發(fā)，先是真菌后是細(xì)菌。搞得我對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)都快失去信心了，我養(yǎng)細(xì)胞都一年半了，平時(shí)細(xì)胞沒什么，感覺養(yǎng)細(xì)胞是很簡(jiǎn)單的事，可是當(dāng)污染大爆發(fā)時(shí)真的有招架不住的感覺。記得當(dāng)時(shí)丟掉了幾乎所有的細(xì)胞，近一百瓶，就只剩下保種的三兩瓶，寒?。?！至于處理方法，也就是乳酸熏蒸（記得把培養(yǎng)箱及超凈臺(tái)打開）之后一周關(guān)門關(guān)窗，不再進(jìn)培養(yǎng)室，一周后75%酒精做*滅菌，也就是用酒精搽培養(yǎng)箱及培養(yǎng)室里的所有平面，甚至包括地面。到現(xiàn)在有四個(gè)月了，偶的細(xì)胞一直很好。建議不要驚慌，所謂兵來將擋，水來土掩。呵呵呵，一切會(huì)好起來的。

21.   看來你要大動(dòng)干戈了。首先考慮培養(yǎng)基的問題。可以單獨(dú)放置一瓶培養(yǎng)基到其他的培養(yǎng)箱里培養(yǎng)24小時(shí)看看是不是培養(yǎng)基污染。不過建議還是全部扔掉重新配置比較好。其次考慮培養(yǎng)箱和培養(yǎng)室的問題?；旧蠎?yīng)該每一個(gè)月將培養(yǎng)箱*消毒一次的。首先用75％酒精擦洗，一般的培養(yǎng)箱都是可以拆卸的，將能拆卸的部分拆開擦洗后放到烤箱里烘烤（180度5個(gè)小時(shí)）。剩下的培養(yǎng)箱里用戊二醛擦洗后用紫外燈反復(fù)照射。然后在要用培養(yǎng)箱培養(yǎng)室之前再用紫外燈照射消毒2小時(shí)。你的照片里顯示的應(yīng)該是細(xì)菌污染，咳比較好對(duì)付。

22.   設(shè)置5％，卻顯示5.1％（當(dāng)然這點(diǎn)差距實(shí)在不算太大，至于顯示HIGH CO2，那是可以自己設(shè)定的，你可以自己設(shè)定二氧化碳濃度達(dá)到多少時(shí)報(bào)警（也即顯示HIGH CO2，同時(shí)可能發(fā)出警鳴音，如果你沒有按MUTE按鈕或同等設(shè)置），同樣地，你可以設(shè)置下限，還有溫度的上下限），培養(yǎng)箱溫度升高時(shí)CO2濃度會(huì)增加，反之亦然。檢查一下你的CO2減壓閥上面顯示的壓力指示是否超過0.08MPa，長(zhǎng)期過高的CO2壓力容易損壞培養(yǎng)箱內(nèi)CO2壓力調(diào)節(jié)模塊，那樣需要很多銀子修理的。如果情況進(jìn)一步惡化，建議售后服務(wù)。

23.   手提式紫外燈

24.   1）一個(gè)大原則是：細(xì)菌和細(xì)胞體系是*不同的，絕不可以放在一起，一般實(shí)驗(yàn)室均設(shè)置細(xì)菌間、細(xì)胞間，嚴(yán)格的分開是成功培養(yǎng)細(xì)胞的保證。

2）關(guān)于CO2培養(yǎng)箱的清潔工作，應(yīng)該說不難。由于為不銹鋼材，你用0.1%新潔爾滅擦洗干凈后，在用2%的CuSO4清洗（清霉菌，在CO2條件下霉菌很易生/），用70%乙醇噴霧消毒箱內(nèi)空氣。再?zèng)龈珊螅俚撞吭偌?%CuSO4（水稍出現(xiàn)蘭色即可）的滅菌水進(jìn)行穩(wěn)定培養(yǎng)箱，待培養(yǎng)箱溫度和濕度穩(wěn)定后，再用一瓶細(xì)胞預(yù)實(shí)驗(yàn)一下，培養(yǎng)2-3天，沒有問題再進(jìn)行培養(yǎng)。

25.   有的培養(yǎng)箱可以直接高溫干烤滅菌的，或者有的金屬架可以干烤

26.   底部水盤加入蒸餾水后見到一片一片的東西，很可能是細(xì)菌群落的生長(zhǎng)！個(gè)人經(jīng)驗(yàn)是，必須清洗，而且是*清洗干凈！拆開支架和每層的托盤，包括水盤（注意拆卸先向技術(shù)員了解內(nèi)部結(jié)構(gòu)，以防誤拆損壞），用碘伏棉球?qū)⑴囵B(yǎng)箱里里外外和拆出來的部件拭擦2次，然后再用酒精將殘留碘伏拭去。下一步是，打開培養(yǎng)箱的門，開紫外照射一晚，這樣就可放心了。我剛回來就是如此弄的，培養(yǎng)的細(xì)胞并沒有感染跡象，活力甚佳，供參考！祝你好運(yùn)！

27.   我使用的方法是：

1 取下培養(yǎng)箱內(nèi)的隔板及掛鉤，用清水清洗干凈后，75%酒精*擦洗消毒，然后120度烤箱，考1小時(shí)。

2，培養(yǎng)箱用清水擦洗干凈后用75%酒精*擦洗消毒

3，帶無菌手套，安裝好培養(yǎng)箱內(nèi)的隔板及掛鉤

4，打開培養(yǎng)箱紫外燈照射30分鐘

5，高壓蒸餾水后加入

我們一直就是這樣做的，效果很好，可以試試看啊。

28.   補(bǔ)充一個(gè)水盤消毒的法子∶清水清洗干凈，75%酒精*擦洗消毒后，多弄些酒精上去，點(diǎn)火燒一下．效果杠杠的??！

29.   把平皿高壓滅菌后,在無菌操作臺(tái)內(nèi)加入適量的滅菌雙蒸水或者生理鹽水.再加少量新潔爾滅,濃度沒關(guān)系

30.   水套式，氣套式二氧化碳培養(yǎng)箱。

31.   細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境要求有一定濕度，必須加水！我的小經(jīng)驗(yàn)是： 1、雙蒸水裝在5L瓶中，2、高溫滅菌，3、移進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室，在紫外照射下冷卻，4、6小時(shí)后，在加入培養(yǎng)箱中使用。

如果發(fā)現(xiàn)托盤中的說有白色漂浮物存在是，盡量吸干?。ù宋锟紤]是霉菌污染）;

還有如果有條件，就是定期75％酒精大清潔！我一般2個(gè)月清潔一次?。ò?xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室）

這樣在無菌操作下，基本保證你免除污染?。?/p>

32.   培養(yǎng)箱內(nèi)不加水是不正規(guī)的，因?yàn)榧?xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境要求有一定濕度。

我們培養(yǎng)細(xì)胞不僅經(jīng)常保持有水，而且培養(yǎng)液中不加任何抗生素。只要無菌操作過關(guān)，不會(huì)發(fā)生細(xì)菌污染。

33.   我們實(shí)驗(yàn)室平常培養(yǎng)箱的消毒方法：（清潔前開紫外30分鐘）

1、隔板的清潔：先將隔板卸下，用干凈紗布沾新潔而滅擦兩遍；

2、箱內(nèi)壁用新潔而滅擦拭后再噴75％酒精，關(guān)門熏蒸15分鐘；

3、盛蒸餾水的盤子：把盤里的水倒掉，用新潔而滅擦拭，干后倒入三蒸水；

4、裝好板后，再噴75％酒精關(guān)門熏蒸30分鐘。

5、培養(yǎng)室開紫外照30分鐘以上。

34.   我們實(shí)驗(yàn)室是將全部隔板卸下，新潔而滅擦拭，放在超凈工作臺(tái)內(nèi)紫外殺菌，CO2孵箱內(nèi)用紫外燈照射12h以上。

35.   推薦方法：拆卸隔板，新潔兒滅搽3次，然后酒精搽3次，紫外下面照2小時(shí)，然后裝上隔板，箱壁同樣處理，打開箱子，用小紫外燈或房間紫外燈照2小時(shí)。注意要搽頂部的螺旋槳。裝好后，噴酒精即可。另外，還是用用硫酸銅比較好，飽和溶液放置在箱子底部。屢試屢爽，大約可以管3-4個(gè)月沒有問題。如有效，請(qǐng)斑竹加分，謝謝！

36.   加硫酸銅的目的是為了防止真菌的生長(zhǎng),但硫酸銅容易改變孵箱pH值,所以建議不加硫酸銅,直接加蒸餾水即可,保持孵箱濕度.

37.   前一段時(shí)間培養(yǎng)箱里老是有散在的細(xì)胞霉菌污染。培養(yǎng)箱高溫消毒后，現(xiàn)在打開，發(fā)現(xiàn)里面那扇玻璃門和墊圈會(huì)有大量水汽，培養(yǎng)瓶外壁也有。請(qǐng)問是怎么回事？細(xì)胞還能養(yǎng)嗎？是因?yàn)榕囵B(yǎng)箱門的加熱故障或設(shè)置錯(cuò)誤，導(dǎo)致門的溫度與箱內(nèi)溫度不一樣，所以引起玻璃門結(jié)水汽。對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)沒多大的影響，因?yàn)橄鋬?nèi)的溫度是正常的。

38.   這種情況很常見，可以用以下方法解決：往水盤里的水加入適量的硫酸銅，攪拌均勻即可，因?yàn)榱蛩徙~是重金屬鹽，可以達(dá)到殺菌效果；另外也可以加10％的新吉爾滅等無刺激性的消毒物質(zhì)。注意，千萬不能直接往水盤里加自來水，因?yàn)樽詠硭镉泻芏酀撛诘拿咕?，一旦條件溫和它們就會(huì)迅速繁殖，是用煮開的蒸餾水。注意了這些細(xì)節(jié)，問題就迎刃而解了